Pași specifici pentru extragerea clorofilei prin fragmentarea celulelor utilizând un concasor de celule cu ultrasunete

Concasorul de celule cu ultrasunete utilizează efectul de dispersie al ultrasunetelor în lichid pentru a crea cavitație, rupând astfel particulele solide sau țesuturile celulare din lichid.
Dezvoltarea industriei biologice a ridicat cerințele pentru experimente care utilizează pulverizatoare cu celule cu ultrasunete, cum ar fi măsurarea și controlul temperaturii probei, îmbunătățirea nivelului de inteligență al probelor de răcire la temperatură joasă și al întregii mașini și așa mai departe.
Etapele specifice pentru extragerea clorofilei prin zdrobirea celulelor cu ultrasunete folosind un concasor de celule cu ultrasunete:
1. Centrifugați sau filtrați proba de apă și instalați o membrană de filtru din fibre de acetat pe filtrul de aspirație. Se toarnă un volum cantitativ de probă de apă pentru filtrare, iar presiunea negativă în timpul filtrării nu trebuie să fie prea mare (aproximativ 50 kPa). După extragerea probei de apă, continuați extragerea timp de 1-2 minute pentru a reduce umiditatea de pe membrana filtrului. Dacă este necesară depozitarea pe termen scurt timp de 1-2 zile, poate fi păstrată într-un frigider obișnuit pentru congelare. Dacă este necesară păstrarea pe termen lung (30 de zile), trebuie păstrată într-un frigider cu temperatură scăzută (-20 grade ).
2. Scoateți membrana filtrului care conține fitoplancton și uscați-o la temperatură scăzută în frigider timp de 6-8 ore. Tăiați-l în bucăți mici cu foarfecele și puneți-l într-un tub de centrifugă de 5 ml sau 10 ml. Adăugați 3-4 ml de acetonă 90% pentru a scufunda fragmentele sub nivelul lichidului. Puneți fragmentele într-un recipient cu ultrasunete și utilizați unde ultrasonice pentru a sparge celulele probei. (Compararea experimentelor la momente și frecvențe diferite pentru a facilita identificarea * timpului și frecvenței de fragmentare pentru metode unificate).
3. Centrifugați proba supusă fragmentării celulare folosind ultrasunete folosind o centrifugă (3000-4000r/min) timp de 10 minute. Se toarnă supernatantul într-un balon cotat de 5 ml sau 10 ml. Se diluează la 5 ml sau 10 ml cu 90% acetonă și se agită bine.
4. Puneți supernatantul pe un spectrofotometru și utilizați o placă colorimetrică cu cale optică de 1 cm pentru a citi valorile absorbanței la lungimi de undă de 750 nm, 663 nm, 645 nm și, respectiv, 630 nm. Utilizați acetonă 90% ca măsurătoare de absorbție martor pentru a corecta absorbanța probei.